孔雀石綠膠體金快速檢測卡(魚蝦組織,水產(chǎn)品)
孔雀石綠,分子式為C23H25ClN2,是人工合成的有機化合物,是一種有毒的三苯甲烷類化學物,既是染料,也是殺真菌、殺細菌、殺寄生蟲的藥物,長期超量使用可致癌,無公害水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域國家明令禁止添加。 2019年12月27日,孔雀石綠被列入食品動物中禁止使用的藥品及其他化合物清單。
孔雀石綠進入水生動物體內(nèi)后,會快速代謝成脂溶性的無色孔雀石綠。孔雀石綠具有潛在的致癌、致畸、致突變的作用,其在養(yǎng)殖業(yè)中的使用未得到美國食品與藥物管理局(FDA )的認可;根據(jù)歐盟法案2002/675/EC的規(guī)定,動物源性食品中孔雀石綠和無色孔雀石綠殘留總量限制為2μg/kg;日本的肯定列表也明確規(guī)定在進口水產(chǎn)品中不得檢出孔雀石綠殘留;我國在農(nóng)業(yè)行業(yè)標準《NY5071- 2002無公害食品魚藥使用準則》中也將孔雀石綠列為禁用藥物。由于沒有低廉有效的替代品,孔雀石綠在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的使用屢禁不止。
深圳艾瑞斯生產(chǎn)的孔雀石綠膠體金快速檢測卡應(yīng)用競爭抑制膠體金免疫層析的原理制成,用于檢測水產(chǎn)品組織樣本中孔雀石綠殘留。樣本溶液滴入檢測卡的加樣孔后,樣本溶液中的孔雀石綠與金標抗體相結(jié)合,從而阻止金標抗體與纖維素膜上孔雀石綠偶聯(lián)物結(jié)合。當樣本溶液中的孔雀石綠含量大于檢測限時,檢測線T不顯色或顯色明顯比C線淺,結(jié)果為陽性;當樣本溶液中孔雀石綠含量小于檢測限時檢測線T顯紫紅色(T線與C線一致或更深),結(jié)果為陰性。
樣本前處理:
1、取切碎的一定量的去脂肪水產(chǎn)品組織樣品,用均質(zhì)機均質(zhì);
2、取約4 g 均質(zhì)物于50 mL 離心管中;
3、依次加入0.5 mL提取劑1和1 mL提取劑2,再加入4 mL乙腈,擰緊管蓋劇烈振蕩混勻2分鐘;
4、室溫下(20-25℃) 4000 轉(zhuǎn)/分鐘離心5 分鐘;
5、吸取1 mL 上清液于10 mL離心管中,加入100 μl氧化劑,60℃下氮氣或空氣吹干,得固體殘渣;
6、向吹干的離心管中加入0.3 mL MG復(fù)溶液,用吸管反復(fù)吸打管內(nèi)液體以沖洗及溶解管壁上的待測物質(zhì),作為待檢樣品溶液。
樣品檢測:
1、撕開鋁箔袋,取出檢測卡,水平放置桌面上;
2、用滴管吸取待檢樣品溶液,垂直滴加4滴(約120 μL)到金標微孔中,再用滴管將微孔中的紅色物質(zhì)和待檢溶液充分混勻,靜置2 min,吸取全部液體滴加到檢測卡的加樣孔中(S處);
3、加樣后開始計時,室溫下放置8-10分鐘判斷結(jié)果,超過10分鐘的結(jié)果只能作為參考。
結(jié)果判斷:
陰性:對照線(C)出現(xiàn)紫紅色線,檢測線(T)顯色比C線深或者一樣深,說明樣品中待檢物質(zhì)濃度低于檢測限或無待檢物殘留。
陽性:對照線(C)出現(xiàn)紫紅色線,檢測線(T)不顯色或T線顯色明顯比C線淺,說明樣品中待測物濃度高于檢測限。T線明顯顯示為綠色的,可判為陽性。
失效:在檢測窗內(nèi),對照線(C)不出現(xiàn)紫紅色線。
注意事項:
1 、過期或鋁箔袋破損的產(chǎn)品,均不可使用。
2 、檢測卡從冰箱中取出時應(yīng)恢復(fù)到室溫后打開,打開的檢測卡應(yīng)盡快使用以免受潮后失效。
3 、不要觸摸檢測卡中央的白色膜面。
4 、取液滴管不可混用,以免交叉污染。
5 、待檢樣品溶液需清亮、無混濁顆粒、無細菌污染,否則容易導(dǎo)致阻塞、顯色不明顯等異?,F(xiàn)象,從而影響實驗結(jié)果的判定。